میزان بیان پلی مورفیسم d۲۹۹g و t۳۹۹i ژن tlr۴ در رده سلولی سرطان کولورکتال به روش فلوسایتومتری

زمینه و هدف : گیرنده های شبه toll (tlrs) به عنوان مهم ترین گیرنده ها در ایمنی ذاتی شناخته شده اند. گیرنده tlr4 به عنوان گیرنده اصلی در شناسایی لیپوپلی ساکارید (lps) باکتری های گرم منفی عمل می کند. دو پلی مورفیسم rs4986790) d299g (snp و (snp rs4986791) t399i در ژن این گیرنده موجب کاهش پاسخ دهی به lps می شود. این مطالعه به منظور تعیین میزان بیان پلی مورفیسم های مختلف ژن tlr4 در رده سلولی سرطان کولورکتال ht29 ، hct116 و caco2 به روش فلوسایتومتری انجام شد. روش بررسی : در این مطالعه آزمایشگاهی انتقال پلاسمید حاوی ژن واریته های مختلف شامل flag-tagged-tlr4وحشی، flag-tagged d299g و flag-tagged t399i موتان به سلول های hct116 توسط معرف turbofect صورت گرفت. راندمان انتقال ژن توسط پلاسمید gfp ارزیابی شد. میزان بیان واریته های مختلف tlr4 در سلول های دریافت کننده ژن ها از طریق فلوسایتومتری بررسی شد. داده ها با استفاده از نرم افزار آماری spss-11.5 و آزمون chi-square تجزیه و تحلیل شدند. یافته ها : رده های سلولی ht29 و caco2گیرنده tlr4 را در سطح پایینی بیان کردند. در حالی که سلول های hct116 قبل از انتقال پلاسمید، ژن tlr4 را در سطح قابل ردیابی به روش فلوسایتومتری بیان نکردند. راندمان انتقال ژن gfp به داخل سلول های hct116 به وسیله آنالیز میکروسکوپی و فلوسایتومتری حدود 80 درصد اندازه گیری شد. براین اساس میزان بیان tlr4و پاسخ دهی به lps در سلول هایی که ژن واریته وحشی tlr4 را دریافت کردند؛ به طور معنی داری بیشتر از سلول هایی بود که ژن واریته موتان را دریافت کردند (p<0.05). نتیجه گیری : سطح پایین بیان tlr4 روی سلول های دارای نوع موتان گیرنده نشان داد که این پلی مورفیسم ها روی بیان گیرنده در سلول های سرطان کولون اثر دارند.